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掃描電鏡服務
關鍵詞：掃描電鏡服務
掃描電鏡服務
一、服務介紹
掃描電鏡是1965年發(fā)明的較現(xiàn)代的細胞生物學研討工具，它具有制樣簡略、擴大倍數(shù)可調范圍寬、圖畫的分辨率高、景深大等特色。近年來，掃描電鏡已廣泛地應用在生物學、醫(yī)學、等學科的領域中。
二、實驗原理
首要是通過發(fā)射電子聚焦光束來掃描樣品的表面形狀.電子束與樣品表面的樣子發(fā)生效果,發(fā)生多種能夠被檢測的信號,這些信號就包含了樣品的表面形狀和組成.染色。
三、實驗流程
1. 樣品的初步處理
a.取材樣品面積可達8mm×8mm，厚度可達5mm。關于易彎曲的樣品如血管、胃腸道粘膜等，可固定在濾紙或卡片紙上，以充沛暴露待調查的安排表面。
b.樣品的清洗
(1)用等滲的生理鹽水或緩沖液清洗；
(2)用5%的蘇打水清洗；
(3)用超聲震蕩或酶消化的辦法進行處理。
c. 固定
固定所用的試劑和透射電鏡樣品制備相同，常用戊二醛及鋨酸雙固定。由于樣品體積較大，固定時間應適當延伸。也可用快速冷凍固定。
d. 脫水
樣品經漂洗后用逐級增高濃度的酒精或丙酮脫水，然后進入中心液，一般用醋酸異戊酯作中心液。
2. 樣品的枯燥
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a.空氣枯燥法
空氣枯燥法又稱自然枯燥法，便是將通過脫水的樣品，讓其暴露在空氣中使脫水劑逐步蒸發(fā)枯燥。這種辦法的最大長處是簡便易行和節(jié)省時間；它的首要缺點是在枯燥過程中，安排會由于脫水劑蒸發(fā)時表面張力的效果而發(fā)生縮短變形。因此，該辦法一般只適用于表面較為堅固的樣品。
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b. 冷凍枯燥法
(1)置于冷凍保護劑中：將樣品置于冷凍保護劑中浸泡數(shù)小時。常用的冷凍保護劑為10%～20%二甲基亞砜水溶液，或15%～40%甘油水溶液。
(2)驟冷：將通過保護劑處理的樣品迅速投入用液氮預冷至(150℃的氟利昂冷凍劑中，使樣品中的水分很快凍結。
(3)枯燥：將已凍結的樣品移到冷凍枯燥器內已預冷的樣品臺上，抽真空，經幾小時或數(shù)天后，樣品即到達枯燥。本辦法不需要脫水，避免了有機溶劑對樣品成分的抽提效果，不會使樣品縮短，也是較早使用的辦法。但是，由于花費時間長，消耗液氮多，簡單發(fā)生冰晶損傷，因此未被廣泛應用。
3. 樣品的導電處理(真空鍍膜法)
真空鍍膜法是使用真空膜儀進行的。其原理是在高真空狀態(tài)下把所要噴鍍的金屬加熱，當加熱到熔點以上時，會蒸發(fā)成極細小的顆粒噴射到樣品上，在樣品表面形成一層金屬膜，使樣品導電。噴鍍用的金屬材料應挑選熔點低、化學性能安穩(wěn)、在高溫下和鎢不起效果以及有高的二次電子發(fā)生率、膜自身沒有結構。現(xiàn)在一般選用金或金和碳。為了取得細的顆粒，有用鉑或用金-鈀、鉑-鈀合金的。金屬膜的厚度一般為10 nm～20 nm。真空鍍膜法所形成的膜，金屬顆粒較粗，膜不夠均勻，操作較雜亂并且費時，現(xiàn)在現(xiàn)已較少使用。
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4. 拍攝
四、客戶提供
安排、細胞
五、公司提供
基本實驗步驟、藥品、樣品處理、圖片及圖片分析
實驗周期：3-4周
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